новости компании о Не покупайте неправильный, буферы PIPES и HEPES очень разные

В биохимических экспериментах и клеточных культурах выбор подходящего буфера является одним из ключевых шагов для обеспечения точности и стабильности эксперимента.N'-bis (((2-этаносульфоновая кислота)) и HEPES (4- ((2-гидроксиэтил)-1-пипаразинетансульфоновая кислота) - два широко используемых буфераХотя все они играют важную роль в регулировании рН растворов, их свойства, сценарии применения и меры предосторожности совершенно разные.Ниже приведен подробный анализ существенных различий между PIPES и HEPES, чтобы помочь научным исследователям и лабораторным специалистам правильно выбрать и использовать эти два буфера..

一Химические свойства и растворимость ПИПЕС и ХЕПЕС
 

1. HEPES
 

(1) Химические свойства: HEPES представляет собой звиттерионный буфер, содержащий аминокислотные и сульфоновые группы в своей молекулярной структуре,что позволяет ему буферизировать изменения концентрации ионов водорода в широком диапазоне рН (6.8-8.2) и поддерживают стабильность рН раствора.
 

(2) Растворимость: HEPES высоко растворимый в воде, что позволяет легко использовать его в различных биохимических экспериментальных системах без необходимости дополнительных шагов растворения.

2. трубы
 

(1) Химические свойства: PIPES также является идеальным буфером с немного более узким диапазоном pH, чем HEPES, на уровне 6,1-7.5Пиперазин кольцо и сульфоновой кислоты группы в его молекулярной структуре дают ему способность буферировать pH в определенных условиях.
 

(2) Растворимость: в отличие от HEPES, PIPES не растворяется в воде, но растворяется в водном растворе NaOH.и его свойства растворимости необходимо учитывать в реальных экспериментах..

2Сценарии применения и функциональные различия между трубами и HEPES
 

1Применение HEPES
 

(1) Клетковая культура: HEPES широко используется в клеточных культурах различных типов организмов, поскольку он не токсичен для клеток и не мешает нормальным биохимическим реакциям.особенно в экспериментальных системах, которые требуют длительного периода времени для поддержания стабильного значения pH.
 

(2) Исследования белков и ферментов: в исследованиях стабильности белков HEPES часто используется в качестве буфера, поскольку он может поддерживать постоянный pH раствора в течение длительного времени.который полезен для поддержания структуры и функции белкаВ то же время он также используется в исследованиях высоковолатильных и чувствительных к pH белков и ферментов.
 

(3) Молекулярная биология: при экстракции ДНК/РНК, диагностических комплектах ПЦР и биохимических диагностических комплектах HEPES является важным буферным компонентом для обеспечения стабильности pH во время эксперимента.
 

2. Применение труб
 

(1) Очистка белка: ПИПЭС имеет особые применения в области очистки белка,такие как очистка тубулина с помощью фосфоцеллюлозной хроматографии и очистка рекомбинантных белков ARF1 и ARF2 с помощью гелевой фильтрацииЕго характеристика необразования стабильных комплексов с большинством ионов металлов делает его хорошим в системах раствора, содержащих ионы металлов.
 

(2) Хроматографический анализ: в катионно-обменной хроматографии PIPES часто используется в качестве компонента буфера или элюента для связывания,но его концентрацию необходимо строго контролировать, чтобы избежать экспериментальных ошибок, вызванных чрезмерной ионной прочностью или изменениями значения pKa.
 

(3) Специфические биохимические эксперименты: Хотя диапазон применения PIPES относительно ограничен, он играет незаменимую роль в качестве буфера в некоторых специфических экспериментах.такие как фосфат кальция и система осаждения ДНК, AFM и электропорации эксперименты.

III. Осторожность при использовании буферов PIPES и HEPES
 

1. Предупреждения для HEPES
 

(1) Интерференция: хотя HEPES не влияет на биохимические процессы в большинстве случаев, он влияет на реакцию между ДНК и рестрикционными ферментами,так что это не подходит для экспериментов, которые требуют точного контроля ДНК фермента резкиВ то же время метод Лоури не подходит для определения содержания белка, что может повлиять на точность результатов определения.
 

(2) Выбор концентрации: при использовании HEPES следует выбрать соответствующую концентрацию в соответствии с экспериментальными требованиями.культуральная среда часто содержит 20 мммоль/л HEPES для достижения достаточной буферной способности.
 

2. Предупреждения для труб
 

(1) Растворимость: Перед использованием PIPES убедитесь, что он полностью растворен в водном растворе NaOH, чтобы избежать вмешательства нерастворенных частиц в эксперименте.
 

(2) Образование свободных радикалов: ПИПЕС может образовывать свободные радикалы, поэтому он не подходит для использования в экспериментах, в которых необходимо избежать окислительных реакций.
 

(3) Зависимость от концентрации: значение pKa PIPES зависит от концентрации, а его ионная прочность относительно велика.Особое внимание следует уделить выбору и контролю концентрации.